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实时荧光定量PCR

简要描述:上海达为科力于临床前药效学CRO实验,为广大药效学实验提供保障。可提供实时荧光定量PCR实验服务。

  • 更新时间:2023-09-15
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详细介绍

实时荧光定量PCR实验服务介绍:

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法,而且也是一个能对核酸分子进行定量的有力工具。1996年,美国Applied Biosystems公司推出了一种新定量试验技术间实时荧光定量PCR它是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针对PCR产物进行标记跟踪;实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时,探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5'端一3'端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成*同步。


实时荧光定量PCR样品准备条件:

细胞样品:收集细胞后放入液氮中速冻保存或速东24h后转入-80°C冰箱保存;收集细胞后,视细胞量,直接加入1-1.5mL Trizol溶解裂解细胞,再转入-80°C冰箱保存。

组织样品:动物组织一般取材后立即放入液氮中速冻保存,液氮冻存24h后可转入-80°C冰箱保存;组织样品同样可以采用Trizol溶解裂解后放入-80°C冰箱保存。特殊组织(植物等)建议采用新鲜组织即刻提取RNA,逆转合成cDNA后-20°C保存备用。所有样品的处理和保存过程中,切总反复冻融。


样品运输条件:

样品运输条件根据实验样品的处理条件,可以选择液氮或者干冰运输。


科研实验服务:

1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析

2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq

3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA

6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选

7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR


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